A'afiaga e tete'e ai i le biofilm ma le fa'aosofiaina o le fa'amalologa o fusi siliva nitrate

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O le tuputupu aʻe o siama i manuʻa e masani ona faʻaalia o ni biofilms, e faʻalavelave ai i le faʻamalologa ma faigata ona faʻaumatia. O fusi siliva fou e fai mai e teteʻe atu i faʻamaʻi pipisi o manuʻa, ae o latou aoga antibiofilm ma aafiaga faʻamalolo e le o iloa e le o iloa. I le faʻaaogaina o faʻataʻitaʻiga biofilm in vitro ma in vivo o Staphylococcus aureus ma Pseudomonas aeruginosa, matou te lipotia atu le aoga o fusi e gaosia ai le ion Ag1+; Ag1+ fusi o loʻo i ai le ethylenediaminetetraacetic acid ma le benzethonium chloride (Ag1+/EDTA/BC), ma fusi o loʻo i ai le silver nitrate (Ag oxysalts). , lea e gaosia ai Ag1+, Ag2+ ma Ag3+ ions e teteʻe atu ai i le biofilm o manuʻa ma lona aʻafiaga i le faʻamalologa. O fusi Ag1+ e laʻititi lava aʻafiaga i le biofilm o manuʻa i vitro ma isumu (C57BL/6j). I se faʻatusatusaga, o le oxygenated Ag salts ma Ag1+/EDTA/BC fusi na faʻaitiitia tele ai le aofaʻi o siama ola i biofilms in vitro ma faʻaalia ai se faʻaitiitia tele o vaega o siama ma EPS i biofilms o manuʻa o isumu. O nei fusi e eseese aafiaga i le fa'amalologa o manu'a ua a'afia i le biofilm ma manu'a e le'i a'afia i le biofilm, fa'atasi ai ma fusi masima okesene e sili atu ona aoga i le toe fa'aleleia o le epithelialization, tele o manu'a, ma le mumū pe a fa'atusatusa i togafitiga fa'atonutonu ma isi fusi siliva. O meatotino fa'aletino eseese o fusi siliva e ono eseese aafiaga i le biofilm o manu'a ma le fa'amalologa, ma e tatau ona mafaufau i lenei mea pe a filifilia se fusi mo le togafitia o manu'a ua a'afia i le biofilm.
O manu'a tumau ua fa'amatalaina o "manu'a e le alualu i luma i tulaga masani o le fa'amalologa i se auala fa'atulagaina ma le taimi talafeagai" 1. O manu'a tumau e mafua ai se avega fa'alemafaufau, fa'aagafesootai ma le tamaoaiga mo gasegase ma le faiga fa'alesoifua maloloina. O tupe fa'aalu fa'aletausaga a le NHS i le togafitia o manu'a ma fa'ama'i tu'ufa'atasi e fa'atatauina i le £8.3 piliona i le 2017–182. O manu'a tumau o se fa'afitauli faigata fo'i i le taimi nei i le Iunaite Setete, ma ua fuafua e Medicare le tau fa'aletausaga o le togafitia o gasegase e iai manu'a i le $28.1–$96.8 piliona3.
O le faʻamaʻi pipisi o se mea taua e taofia ai le faʻamaloloina o manuʻa. E masani ona aliali mai faʻamaʻi pipisi o ni biofilms, lea e iai i le 78% o manuʻa tumau e le faʻamaloloina. E fausia biofilms pe a pipii mau siama i luga, e pei o luga o manuʻa, ma e mafai ona faʻaputu e fausia ai ni vaega e gaosia ai le extracellular polymer (EPS). O le biofilm o manuʻa e fesoʻotaʻi ma le faʻateleina o le tali atu i le mumū e oʻo atu ai i le faʻaleagaina o aʻano, lea e mafai ona faʻatuai pe taofia ai le faʻamalologa4. O le faʻateleina o le faʻaleagaina o aʻano atonu e mafua ona o le faʻateleina o le gaioiga o matrix metalloproteinases, collagenase, elastase ma reactive oxygen species5. E le gata i lea, o sela mumū ma biofilms o ni tagata faʻaaogaina tele le okesene ma o lea e mafai ai ona mafua ai le hypoxia o aʻano i le lotoifale, ma faʻaitiitia ai le okesene taua e manaʻomia e sela mo le toe faʻaleleia lelei o aʻano6.
E matuā tete'e atu lava biofilms ua matutua i vaila'au fa'ama'i siama, e mana'omia ai ni ta'iala malolosi e pulea ai fa'ama'i pipisi o le biofilm, e pei o togafitiga fa'amekanika ona sosoo ai lea ma togafitiga fa'ama'i siama lelei. Talu ai e mafai e biofilms ona vave toe fa'afouina, e mafai e vaila'au fa'ama'i siama lelei ona fa'aitiitia le lamatiaga o le toe fa'afouina pe a uma ona aveese le siama mai le tino i se taotoga7.
Ua fa'ateleina le fa'aaogaina o le siliva i vaila'au fa'ama'i siama ma e masani ona fa'aaogaina o se togafitiga muamua mo manu'a tumau ua a'afia. E tele vaila'au fa'ama'i siliva o lo'o maua fa'apisinisi, e tofu lava ma se fa'atulagaga siliva eseese, fa'aputuga, ma le fa'avae autu. O le alualu i luma i fusi lima siliva ua i'u ai i le atina'eina o ni fusi lima siliva fou. O le foliga u'amea o le siliva (Ag0) e le gaoioi; Ina ia ausia le aoga fa'ama'i siama, e tatau ona leiloa se eletise e fausia ai le siliva ionic (Ag1+). O vaila'au fa'ama'i siliva masani e aofia ai ni fa'aputuga siliva po'o ni siliva u'amea, pe a fa'aalia i le vai, e pala e fausia ai ni ion Ag1+. O nei ion Ag1+ e tali atu ma le sela siama, e aveese ai eletise mai vaega fa'atulagaina po'o ni faiga taua e mana'omia mo le ola. O tekinolosi ua pateniina ua i'u ai i le atina'eina o se fa'aputuga siliva fou, Ag oxysalts (silver nitrate, Ag7NO11), lea e aofia i vaila'au fa'ama'i manu'a. E le pei o le siliva masani, o le pala o masima o lo'o i ai le okesene e maua ai ni tulaga o le siliva ma le maualuga o le valence (Ag1+, Ag2+ ma le Ag3+). Ua faʻaalia i suʻesuʻega in vitro e sili atu le aoga o le maualalo o le oxygenated silver mass nai lo le single ion silver (Ag1+) e faʻasaga i siama faʻamaʻi e pei o le Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ma le Escherichia coli8,9. O le isi ituaiga fou o le silver dressing e aofia ai mea faʻaopoopo, o le ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) ma le benzethonium chloride (BC), ia ua lipotia mai e faʻatatau i le biofilm EPS ma faʻateleina ai le ulufale atu o le siliva i totonu o le biofilm. O nei tekinolosi siliva fou e ofoina atu ni auala fou e faʻatatau ai biofilms manuʻa. Peitaʻi, o le aʻafiaga o nei antimicrobials i le siosiomaga o manuʻa ma le faʻamalologa e le faʻamaʻi e taua tele ina ia mautinoa latou te le faia se siosiomaga le lelei o manuʻa pe faʻatuai ai le faʻamalologa. Ua lipotia mai popolega e uiga i le in vitro silver cytotoxicity i le tele o silver dressing10,11. Peitaʻi, o le in vitro cytotoxicity e leʻi faʻaliliuina i le in vivo toxicity, ma o le tele o Ag1+ dressing ua faʻaalia ai se tulaga saogalemu lelei12.
Iinei, na matou suʻesuʻeina ai le aogā o fusi carboxymethylcellulose o loʻo i ai ni faʻasologa fou o siliva e faʻasaga i le biofilm o manuʻa i totonu o le vitro ma totonu o le tino. E le gata i lea, na iloiloina ai foʻi aafiaga o nei fusi i tali atu o le puipuiga o le tino ma le faʻamalologa e tutoʻatasi mai le faʻamaʻi.
O fa'aofuofu uma na fa'aaogaina sa maua fa'apisinisi. O le 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) o se fa'aofuofu e le fa'ama'i siama 100% carboxymethylcellulose (CMC) gel fiber lea na fa'aaogaina o se fa'aofuofu fa'atonutonu i lenei su'esu'ega. E tolu fa'aofuofu siliva CMC antimicrobial na iloiloina, o le 3M Kerracel Ag dressing (3M, Knutsford, UK), lea e aofia ai le 1.7 wt%. oxygenated silver salt (Ag7NO11) i totonu o ions siliva valence maualuga (Ag1+, Ag2+ ma Ag3+). I le taimi o le fa'aleagaina o le Ag7NO11, e fausia ai ions Ag1+, Ag2+ ma Ag3+ i le fua fa'atatau o le 1:2:4. O le Aquacel Ag Extra dressing o lo'o i ai le 1.2% silver chloride (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 ma le Aquacel Ag + Extra dressing o lo'o i ai le 1.2% silver chloride (Ag1+), EDTA ma le benzethonium chloride (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
O ituaiga siama na fa'aaogaina i lenei su'esu'ega o le Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) ma le Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
Sa totoina siama i le po atoa i le supo Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK). Ona fa'afefiloi lea o le fa'ato'aga i le po atoa i le fua fa'atatau 1:100 i le supo Mueller-Hinton ma fa'apipi'i le 200 µl i luga o membrane Whatman cyclopore e 0.2 µm (Whatman plc, Maidstone, UK) i luga o ipu agar Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Peretania Tele). ) Fausiaina o biofilm colonial i le 37°C mo le 24 itula. O nei biofilm colonial sa fa'ata'ita'iina mo le fa'aitiitia o le logarithmic.
'Oti'oti le fusi i ni fasi sikuea e 3 cm2 ma fa'asusu muamua i le vai mama ma le vai e leai ni ion. Tu'u le fusi i luga o le biofilm o le kolone i luga o le agar plate. O le biofilm i le 24 ha uma e aveese, ma o siama ola i totonu o le biofilm (CFU/ml) na fuaina e ala i le fa'asolosolo o le fa'asusu (10−1 i le 10−7) i le Day-Angle neutralization broth (Merck-Millipore). A mae'a le 24 itula o le fa'asusu i le 37°C, na faia ai le faitauga masani o le plate i luga o le Mueller-Hinton agar plates. O togafitiga ta'itasi ma le taimi atofaina na faia fa'atolu, ma toe faia le faitauga o le plate mo fa'asusu ta'itasi.
E maua le pa'u o le manava pua'a mai pua'a fafine Large White i totonu o le 15 minute talu ona fasia e tusa ai ma tulaga fa'atonuina o le auina atu i fafo a le Iuni a Europa. Sa seleina le pa'u ma fa'amamāina i solo 'ava malosi, ona fa'a'aisa lea i le -80°C mo le 24 itula e fa'aitiitia ai le malosi o le pa'u. A uma ona fa'amalūlūina, sa fufuluina fa'atolu fasi pa'u e 1 cm2 i le PBS, 0.6% sodium hypochlorite, ma le 70% ethanol mo le 20 minute i taimi ta'itasi. A'o le'i aveeseina le epidermis, aveese so'o se ethanol o totoe e ala i le fufuluina fa'atolu i le PBS mama. Sa totoina le pa'u i totonu o se ipu e 6-well ma se membrane nylon mafiafia e 0.45-μm (Merck-Millipore) i luga ma 3 pads mitiia (Merck-Millipore) o lo'o i ai le 3 ml fetal bovine serum (Sigma) fa'aopoopo i le 10% Dulbecco's modified Eagle. Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Sa totoina ni biofilms fa'akolone e pei ona fa'amatalaina mo su'esu'ega o le fa'aalia o le biofilm. Ina ua mae'a ona fa'ato'aga le biofilm i luga o le membrane mo le 72 itula, sa fa'apipi'i le biofilm i luga o le pa'u e fa'aaoga ai se tui fa'ama'i mama ma aveese le membrane. Ona fa'ato'aga lea o le biofilm i luga o le pa'u o le pua'a mo le isi 24 itula i le 37°C ina ia mafai ai e le biofilm ona matua ma pipii i le pa'u o le pua'a. Ina ua mae'a ona matua ma pipii le biofilm, sa fa'apipi'i sa'o se fusi e 1.5 cm2, ua uma ona fa'asusu i le vai mama, i luga o le pa'u ma fa'ato'aga i le 37°C mo le 24 itula. Sa va'aia siama olaola e ala i le valivali e ala i le fa'apipi'iina tutusa o le PrestoBlue cell viability reagent (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) i luga o le apical o explant ta'itasi ma fa'ato'aga mo le 5 minute. Fa'aaoga le meapueata numera Leica DFC425 e pu'eina vave ai ata i luga o le microscope Leica MZ8. O vaega e lanu piniki sa fuaina e faʻaaoga ai le polokalama Image Pro lomiga 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)). Sa faia le scanning electron microscopy e pei ona faʻamatalaina i lalo.
O siama na totoina i le po atoa na fa'afefiloi i le 1:100 i le supo Mueller-Hinton. E 200 μl o le fa'ato'aga na fa'aopoopo i le 0.2 μm Whatman cyclopore membrane (Whatman, Maidstone, UK) ma fa'apipi'i i luga o le Mueller-Hinton agar. Na fa'asusu ipu biofilm i le 37°C mo le 72 itula e fa'ataga ai le fausiaina o le biofilm matua.
A maeʻa aso e 3 o le matua o le biofilm, sa tuʻu saʻo se fusi faʻatafafā e 3 cm2 i luga o le biofilm ma faʻasusu i le 37°C mo le 24 itula. A maeʻa ona aveese le fusi mai le fogāeleele o le biofilm, sa faʻaopoopoina le 1 ml o le PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) i luga o biofilm taʻitasi mo le 20 sekone. Sa faʻamago ia fogāeleele aʻo leʻi faʻamaumauina suiga o lanu e faʻaaoga ai se meapueata numera Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK).
Saunia ni fa'ato'aga i le po atoa i luga o le Mueller-Hinton agar, fa'aliliu atu kolone ta'itasi i le 10 ml o le supo Mueller-Hinton ma fa'asusu i luga o se lulu i le 37°C (100 rpm). A mae'a ona fa'asusu i le po atoa, ona fa'afefiloi lea o le fa'ato'aga i le fua fa'atatau 1:100 i le supo Mueller-Hinton ma fa'asusu le 300 µl i luga o le 0.2 µm o le membrane cyclopore fa'ata'amilomilo Whatman (Whatman International, Maidstone, UK) i luga o le Mueller-Hinton agar ma fa'asusu i le 37°C i totonu o le 72 itula. . O le biofilm ua matua na fa'apipi'i i le manu'a e pei ona fa'amatalaina i lalo.
O galuega uma ma manu sa faatinoina i le Iunivesite o Manchester i lalo o se laisene o le poloketi ua faamaonia e le Ofisa o le Soifua Manuia o Manu ma le Iloiloga Tau Amio (P8721BD27) ma e tusa ai ma taiala na lomia e le Ofisa o le Initeria i lalo o le ASPA toe teuteuina i le 2012. Sa tausisia e tusitala uma taiala o le taunuu mai. O isumu C57BL/6j e valu vaiaso le matutua (Envigo, Oxon, UK) sa faaaogaina mo suesuega uma i totonu o le tino ola. Sa faagase isumu i le isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) ma sa seleina ma faamama o latou pito i tua. Ona tuuina atu lea i isumu taitasi se manua tipi ese e 2 × 6 mm e faaaoga ai se tui biopsy a le Stiefel (Schuco International, Hertfordshire, UK). Mo manua ua aafia i le biofilm, faaaoga le biofilm colonial e 72-itula ua totoina i luga o le membrane e pei ona faamatalaina i luga i le vaega o le pa'u o le manua e faaaoga ai se matasele tui mama i le taimi lava e uma ai le manua ma lafoa'i le membrane. E tasi le senitimita faatafafa o le fusi ua uma ona faasusuina i le vai mama e faatumauina ai se siosiomaga susu o le manua. Sa fa'apipi'i sa'o ni fusi i manu'a ta'itasi ma ufiufi i le 3M Tegaderm film (3M, Bracknell, UK) ma le Mastisol liquid adhesive (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) ma fa'apipi'i i autafa e fa'aopoopo ai le pipii. Sa fa'aogaina le Buprenorphine (Animalcare, York, UK) i le malosi e 0.1 mg/kg e fai ma vaila'au fa'amama tiga. Fa'aumatia isumu i le tolu aso talu ona manu'a e fa'aaoga ai le metotia o le Fa'asologa 1 ma aveese, vaelua, ma teu le vaega o le manu'a pe a mana'omia.
Sa faia le valivali o le Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) ma le eosin (ThermoFisher Scientific) e tusa ai ma le fa'atonuga a le kamupani gaosi oloa. Sa fuaina le vaega o le manu'a ma le toe fa'aleleia o le epithelialization e fa'aaoga ai le polokalama Image Pro lomiga 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD).
Sa aveeseina vaega o aano o manu'a i le xylene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK), toe fa'asusu i le 100–50% ethanol ua fa'avasegaina, ma fa'asusu pu'upu'u i le vai fa'amama (ThermoFisher Scientific). Sa faia le Immunohistochemistry e fa'aaoga ai le VectaStain Elite ABC PK-6104 kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) e tusa ai ma le fa'atonuga a le kamupani gaosi oloa. O antibodies muamua i neutrophils NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) ma macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) sa fa'avaivaia 1:100 i le vai poloka ma fa'aopoopo i luga o le mea ua tipiina, sosoo ai ma antibodies e 2 Anti-, VectaStain ABC ma le Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substrate kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) ma valivali fa'atasi i le hematoxylin. Na maua ata e faʻaaoga ai se microscope Olympus BX43 ma se meapueata numera Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
O faʻataʻitaʻiga o le paʻu na faʻamauina i le 2.5% glutaraldehyde ma le 4% formaldehyde i le 0.1 M HEPES (pH 7.4) mo le 24 itula i le 4°C. Na faʻamago faʻataʻitaʻiga e faʻaaoga ai le ethanol faʻavasegaina ma faʻamago i le CO2 e faʻaaoga ai le Quorum K850 critical point dryer (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) ma ufiufi le sputter i le gold-palladium alloy e faʻaaoga ai le Quorum SC7620 mini sputterer/glow discharge system. Na pueina ata o faʻataʻitaʻiga e faʻaaoga ai le FEI Quanta 250 scanning electron microscope (ThermoFisher Scientific) e vaʻai ai i le ogatotonu o le manuʻa.
Sa fa'aogaina le Toto-1 iodide (2 μM) i luga o le manu'a o le isumu ua tipi ese ma fa'a'aisa mo le 5 minute i le 37 °C (ThermoFisher Scientific) ma togafitia i le Syto-60 (10 μM) i le 37 °C (ThermoFisher Scientific). Sa fatuina ata Z-stack e 15-minute e fa'aaoga ai le Leica TCS SP8.
Sa fa'avasegaina ma au'ili'ili fa'amaumauga fa'aola ma fa'atekinisi o le toe fa'ata'ita'iina e fa'aaoga ai le polokalama Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). O le au'ili'iliga e tasi le itu o le eseesega ma fa'atusatusaga eseese e fa'aaoga ai le su'ega a Dunnett's post hoc sa fa'aaogaina e su'e ai eseesega i le va o togafitiga ta'itasi ma le fusi e le fa'aaogaina ai vaila'au fa'amama. O le tau p <0.05 sa manatu e taua.
O le aoga o fusi fa'apipi'i siliva gel na muamua iloiloina fa'asaga i kolone biofilm o Staphylococcus aureus ma Pseudomonas aeruginosa i totonu o le vitro. O fusi siliva e iai ni fa'atulagaga eseese o siliva: o fusi siliva masani e gaosia ai ions Ag1+; o fusi siliva, lea e mafai ona gaosia ai ions Ag1+ pe a uma ona fa'aopoopoina le EDTA/BC, e mafai ona fa'aumatia le matrix biofilm ma fa'aalia ai siama i le siliva i lalo o le aafiaga antibacterial o ions siliva15 ma fusi o lo'o iai masima Ag oxygenated e gaosia ai ions Ag1+, Ag2+ ma Ag3+. O lona aoga na fa'atusatusaina i se fusi e le fa'asaina ai siama e faia mai ie gelled. O siama olaola o lo'o totoe i totonu o le biofilm na iloiloina i itula uma e 24 mo aso e 8 (Ata 1). I le aso 5, na toe fa'asusuina ai le biofilm i le 3.85 × 105S. Staphylococcus aureus po'o le 1.22 × 105P. aeruginosa e iloilo ai le toe fa'aleleia o le biofilm. Pe a faatusatusa i fusi e le o ni vailaau e pulea ai siama, e itiiti lava se aafiaga o fusi Ag1+ i le olaola o siama i totonu o siama Staphylococcus aureus ma Pseudomonas aeruginosa i le silia ma le 5 aso. I se faatusatusaga, o fusi o loʻo i ai le okesene Ag ma Ag1+ + EDTA/BC sa aoga i le fasiotia o siama i totonu o le biofilm i totonu o le 5 aso. Ina ua maeʻa ona toe faʻapipiʻi i siama planktonic i le aso 5, e leai se toe faʻaleleia o le biofilm na matauina (Ata 1).
Fuainumera o siama ola i totonu o Staphylococcus aureus ma Pseudomonas aeruginosa biofilms ina ua uma ona togafitia i fusi siliva. O kolone biofilm o Staphylococcus aureus ma Pseudomonas aeruginosa na togafitia i fusi siliva po'o fusi e le fa'aaogaina ai vaila'au e pulea ai siama, ma o le aofa'i o siama ola o totoe na fuafuaina i itula ta'i 24. A mae'a aso e 5, na toe fa'asusuina le biofilm i le 3.85×105S. Staphylococcus aureus po'o le 1.22×105P. O kolone o le bacterioplankton Pseudomonas aeruginosa na faia ta'itasi e iloilo ai le toe fa'aleleia o le biofilm. O ata o lo'o fa'aalia ai le averesi +/- standard error.
Ina ia vaʻaia le aʻafiaga o fusi siliva i le olaola o le biofilm, na faʻaaogaina fusi i biofilm matutua na totoina i luga o le paʻu puaʻa ex vivo. A maeʻa le 24 itula, ona aveese lea o le fusi ma vali le biofilm i se vali lanumoana e tali atu ai, lea e faʻafefiloi e siama ola i se lanu piniki. O biofilm na togafitia i fusi faʻatonutonu sa piniki, o loʻo faʻaalia ai le i ai o siama ola i totonu o le biofilm (Ata 2A). I ​​se faʻatusatusaga, o le biofilm na togafitia i le fusi Ag oxysols sa lanumoana tele lava, o loʻo faʻaalia ai o siama o totoe i luga o le paʻu o le puaʻa o siama e le olaola (Ata 2B). O le lanu lanumoana ma le piniki fefiloi na matauina i biofilm na togafitia i fusi o loʻo i ai le Ag1+, o loʻo faʻaalia ai le i ai o siama ola ma siama e le olaola i totonu o le biofilm (Ata 2C), ae o fusi EDTA/BC o loʻo i ai le Ag1+ sa lanumoana tele lava ma ni togitogi piniki. o loʻo faʻaalia ai vaega e leʻi aʻafia i le fusi siliva (Ata 2D). O le fuaina o vaega o loʻo galue (piniki) ma vaega e le galue (lanumoana) na faʻaalia ai o le vaega pulea e 75% le malosi (Ata 2E). O le Ag1+ + EDTA/BC dressings na tutusa lelei ma le oxygenated Ag salt dressings, faatasi ai ma le fua faatatau o le ola e 13% ma le 14%, i le faasologa. O le Ag1+ dressing na faaitiitia ai foi le ola o siama i le 21%. Ona matauina lea o nei biofilms e faaaoga ai le scanning electron microscopy (SEM). Ina ua maeʻa togafitiga i le control dressing ma le Ag1+ dressing, na matauina ai se vaega o le Pseudomonas aeruginosa o ufiufi le paʻu puaa (Ata 2F,H), ae ina ua maeʻa togafitiga i le Ag1+ dressing, e na o ni nai sela siama na maua ma e na o ni nai sela siama na maua i lalo. E mafai ona manatu i alava collagen o le fausaga o le paʻu puaa (Ata 2G). Ina ua maeʻa togafitiga i le Ag1+ + EDTA/BC dressing, na vaaia ai ni palasi siama ma ni palasi collagen fiber o loo i lalo ifo (Ata 2I).
Va'aiga o le biofilm a le Pseudomonas aeruginosa ina ua mae'a togafitiga i le fa'aofuofu siliva. (A–D) O le olaola o siama i totonu o biofilm a le Pseudomonas aeruginosa na totoina i luga o le pa'u pua'a na va'aia e fa'aaoga ai le vali olaola PrestoBlue i le 24 itula talu ona togafitia i fa'aofuofu siliva po'o fa'aofuofu e le fa'aaogaina ai siama. O siama ola e piniki, o siama e le olaola ma o le pa'u pua'a e lanumoana. (E) Fuainumera o biofilm a le Pseudomonas aeruginosa na totoina i luga o le pa'u pua'a (ila piniki) e fa'aaoga ai le microscopy eletise su'esu'e Ata Pro lomiga 10 (FI) ma togafitia i se fa'aofuofu siliva po'o se fa'aofuofu e le fa'aaogaina ai siama mo le 24 itula. Pa fua fa'atatau SEM = 5 µm. (J–M) O biofilm colonial na ola i luga o faamama ma valiina i le vali tali atu a le PrestoBlue ina ua mae'a le 24 itula o le fa'asusuina i fa'aofuofu siliva.
Ina ia iloa pe na aʻafia le aoga o fusi ona o le vavalalata o le fesootaʻiga i le va o fusi ma biofilms, o biofilms colonial na tuʻuina i luga o se mea mafolafola na togafitia i fusi mo le 24 itula ona valiina lea i vali e tali atu ai. O le biofilm e leʻi togafitia sa lanu piniki pogisa (Ata 2J). E ese mai biofilms na togafitia i fusi o loʻo i ai le oxygenated Ag salts (Ata 2K), o biofilms na togafitia i fusi o loʻo i ai le Ag1+ poʻo le Ag1+ + EDTA/BC na faʻaalia ai ni fusi o le lanu piniki (Ata 2L,M). O lenei lanu piniki e faʻaalia ai le i ai o siama ola ma e fesoʻotaʻi ma le vaega o suʻi i totonu o le fusi. O nei vaega ua suʻiina e faia ai ni avanoa mate e mafai ai e siama i totonu o le biofilm ona ola.
Mo le iloiloina o le aoga o fusi siliva i totonu o le tino ola (in vivo), o manu'a mafiafia atoa o isumu ua uma ona tipi ese ua a'afia i siama matutua o le S. aureus ma le P. aeruginosa na togafitia i fusi e le fa'asaina ai siama po'o fusi siliva. Ina ua mavae aso e 3 o togafitiga, o le au'ili'iliga o ata macroscopic na fa'aalia ai ni manu'a laiti pe a togafitia i fusi masima okesene pe a fa'atusatusa i fusi e le fa'asaina ai siama ma isi fusi siliva (Ata 3A-H). Mo le fa'amaoniaina o nei matauga, na seleseleina manu'a ma fuaina le lautele o le manu'a ma le toe fa'afouina o le epithelialization i luga o vaega o a'ano ua valiina i le hematoxylin ma le eosin e fa'aaoga ai le polokalama image pro lomiga 10 (Ata 3I-L).
O le aafiaga o fusi siliva i luga o le manu'a ma le toe fa'afouina o le epithelialization o manu'a ua a'afia i biofilms. (A–H) Sela laiti ua a'afia i biofilms o Pseudomonas aeruginosa (A–D) ma Staphylococcus aureus (E–H) ina ua mavae aso e tolu o togafitiga i se fusi e le fa'asaina ai siama, se fusi Ag masima oxygenated, se fusi Ag1+, ma se fusi Ag1+. Ata fa'atusa o le macroscopic. manu'a o isumu ma le Ag1+ + EDTA/BC dressing. (IL) Fa'atusa o le fa'ama'i Pseudomonas aeruginosa, vaega histological ua valiina i le hematoxylin ma le eosin, fa'aaoga e fuafua ai le vaega o le manu'a ma le toe fa'afouina o le epithelial. Fuainumera o le vaega o le manu'a (M, O) ma le pasene o le toe fa'afouina o le epithelialization (N, P) o manu'a ua a'afia i biofilms o Pseudomonas aeruginosa (M, N) ma Staphylococcus aureus (O, P) (i le vaega togafitiga n = 12). O ata o lo'o fa'aalia ai le averesi +/- standard error. * o lona uiga p = < 0.05 ** o lona uiga p = < 0.01; Fua fa'atatau = 2.5 mm, fua fa'atatau histological = 500 µm.
O le fuaina o le vaega o manu'a i manu'a ua a'afia i le Pseudomonas aeruginosa biofilm (Ata 3M) na fa'aalia ai o manu'a na togafitia i le Ag oxysalts e 2.5 mm2 le averesi o le lapo'a o le manu'a, ae o le fusi e le fa'aaogaina ai vaila'au fa'ama'i pipisi e 3.1 mm2 le averesi o le lapo'a o le manu'a, lea e le moni. Na o'o atu i le taua fa'amaufa'ailoga (Ata 3M). p = 0.423). O manu'a na togafitia i le Ag1+ po'o le Ag1+ + EDTA/BC e le'i fa'aalia ai se fa'aitiitia o le vaega o le manu'a (3.1 mm2 ma le 3.6 mm2, i le fa'asologa). O togafitiga i le fusi masima Ag fa'ama'i e fa'aleleia atili ai le toe fa'aleleia o le epithelialization nai lo le fusi e le fa'aaogaina ai vaila'au fa'ama'i pipisi (34% ma le 15%, i le fa'asologa; p = 0.029) ma le Ag1+ po'o le Ag1+ + EDTA/BC (10% ma le 11%) (Ata 3N). . , i le fa'asologa).
O aga tutusa i le vaega o manu'a ma le toe fa'afouina o le epithelial na matauina i manu'a ua a'afia i biofilms a le S. aureus (Ata 3O). O fusi o lo'o i ai masima siliva ua fa'a'okeseneina na fa'aitiitia ai le vaega o manu'a (2.0 mm2) i le 23% pe a fa'atusatusa i le fusi fa'atonutonu e le o ni vaila'au fa'ama'i siama (2.6 mm2), e ui lava e le'i taua tele lenei fa'aitiitia (p = 0.304) (Ata 3O). E le gata i lea, o le vaega o manu'a i le vaega togafitiga Ag1+ na fa'aitiitia teisi (2.4 mm2), ae o le manu'a na togafitia i le fusi Ag1+ + EDTA/BC e le'i fa'aitiitia ai le vaega o manu'a (2.9 mm2). O masima o le okesene o le Ag na fa'aleleia atili ai fo'i le toe fa'afouina o epithelial o manu'a ua a'afia i le biofilm a le S. aureus (31%) i se tulaga sili atu nai lo i latou na togafitia i fusi fa'atonutonu e le o ni vaila'au fa'ama'i siama (12%, p = 0.003) (Ata 3P). O le Ag1+ dressing (16%, p = 0.903) ma le Ag+1 + EDTA/BC dressing (14%, p = 0.965) na faʻaalia ai le maualuga o le toe faʻafouina o le epithelial e tutusa ma le vaega faʻatonutonu.
Ina ia va'ai faalemafaufau i le aafiaga o vali siliva i luga o le biofilm matrix, na faia ai le valiina o le Toto 1 ma le Syto 60 iodide (Ata 4). O le Toto 1 iodide o se vali e le mafai ona sosolo i sela e mafai ona fa'aaogaina e va'ai sa'o ai i le extracellular nucleic acids, lea e tele i le EPS o biofilms. O le Syto 60 o se vali e mafai ona sosolo i sela e fa'aaogaina o se counterstain16. O matauga o le Toto 1 ma le Syto 60 iodide i manu'a na fa'apipi'iina i biofilms o le Pseudomonas aeruginosa (Ata 4A-D) ma le Staphylococcus aureus (Ata 4I-L) na fa'aalia ai ina ua mavae aso e 3 o togafitiga fa'apipi'i, na matua fa'aitiitia le EPS i le biofilm. o lo'o i ai masima okesene Ag ma Ag1+ + EDTA/BC. O vali Ag1+ e aunoa ma ni vaega fa'aopoopo o le antibiofilm na matua fa'aitiitia ai le DNA e leai se sela i manu'a na fa'apipi'iina i le Pseudomonas aeruginosa ae le'i aoga tele i manu'a na fa'apipi'iina i le Staphylococcus aureus.
Ata i totonu o le tino ola o le biofilm o le manu'a pe a uma aso e 3 o togafitiga i le fa'aaogaina o fusi fa'atonutonu po'o fusi siliva. Ata fa'alilolilo o le Pseudomonas aeruginosa (A–D) ma le Staphylococcus aureus (I–L) ua valiina i le Toto 1 (lanumeamata) e va'aia ai ni nucleic acid i fafo atu o le tino, o se vaega o polymers biofilm i fafo atu o le tino. Mo le valiina o nucleic acid i totonu o le tino, fa'aaoga le Syto 60 (mumu). acids. P. Scanning electron microscopy o manu'a ua a'afia i le Pseudomonas aeruginosa (E–H) ma le Staphylococcus aureus (M–P) biofilms pe a uma aso e 3 o togafitiga i le fa'aaogaina o fusi fa'atonutonu ma fusi siliva. Pa fua SEM = 5 µm. Pa fua fa'atatau o le ata fa'alilolilo = 50 µm.
O le scanning electron microscopy na faʻaalia ai o isumu na tui i kolone biofilm o le Pseudomonas aeruginosa (Ata 4E-H) ma le Staphylococcus aureus (Ata 4M-P) e matua itiiti lava siama i o latou manuʻa ina ua mavae aso e 3 o togafitiga i fusi siliva uma.
Ina ia iloilo le aafiaga o fusi siliva i le mumū o manu'a i isumu ua a'afia i le biofilm, o vaega o manu'a ua a'afia i le biofilm na togafitia i fusi fa'atonutonu po'o fusi siliva mo le 3 aso na valiina i le immunohistochemical e fa'aaoga ai antibodies fa'apitoa mo neutrophils ma macrophages. Fuafuaina o neutrophils ma macrophages i totonu. granulation tissue. Ata 5). O fusi siliva uma na fa'aitiitia ai le aofa'i o neutrophils ma macrophages i manu'a ua a'afia i le Pseudomonas aeruginosa pe a fa'atusatusa i fusi fa'atonutonu e le o ni antimicrobial pe a uma aso e tolu o togafitiga. Peita'i, o togafitiga i le fusi masima siliva oxygenated na mafua ai le fa'aitiitia tele o neutrophils (p = <0.0001) ma macrophages (p = <0.0001) pe a fa'atusatusa i isi fusi siliva na fa'ata'ita'iina (Ata 5I,J). E ui lava o le Ag1+ + EDTA/BC na i ai se aafiaga tele i le biofilm o manu'a, ae na fa'aitiitia ai le maualuga o le neutrophil ma le macrophage i se tulaga maualalo nai lo le fusi Ag1+. O manu'a feololo ua a'afia i le S. aureus biofilm na matauina fo'i ina ua uma ona fa'aofuina i le Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) ma le Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) oxisols pe a fa'atusatusa i le vaega e pulea. O aga fa'apena fo'i e matauina mo le neutropenia. fusi (Ata 5K). Peita'i, na'o le fa'aofuina o le masima Ag ua fa'a'okeseneina na fa'aalia ai se fa'aitiitiga tele i le aofa'i o macrophages i totonu o le granulation tissue pe a fa'atusatusa i le vaega e pulea i manu'a ua a'afia i le S. aureus biofilms (p = 0.0339) (Ata 5L).
Sa fuaina Neutrophils ma macrophages i manu'a ua a'afia i le Pseudomonas aeruginosa ma le Staphylococcus aureus biofilms ina ua mavae aso e 3 o togafitiga i le non-antimicrobial control po'o silver dressings. Neutrophils (AD) ma macrophages (EH) sa fuaina i vaega o a'ano ua valiina i antibodies faapitoa mo neutrophils po'o macrophages. Fuainumera o neutrophils (I ma K) ma macrophages (J ma L) i manu'a ua a'afia i le Pseudomonas aeruginosa (I ma J) ma le Staphylococcus aureus (K & L) biofilms. N = 12 i le vaega. O ata o lo'o fa'aalia ai le averesi +/- standard error, taua taua pe a fa'atusatusa i le non-antibacterial control dressing, * o lona uiga p = < 0.05, ** o lona uiga p = < 0.01; *** o lona uiga p = < 0.001; fa'ailoa mai p = < 0.0001).
Ona matou iloiloina lea o le aafiaga o fusi siliva i le faamalologa e tutoatasi mai le pipisi. O manu'a e le'i pipisi na togafitia i se fusi e pulea ai siama po'o se fusi siliva mo le 3 aso (Ata 6). I totonu o fusi siliva na tofotofoina, na o manu'a na togafitia i le fusi masima okesene na foliga mai e la'ititi ifo i ata makroskopi nai lo manu'a na togafitia i le vaega pulea (Ata 6A-D). O le fuaina o le vaega o le manu'a e fa'aaoga ai le au'ili'iliga histological na fa'aalia ai o le averesi o le vaega o le manu'a ina ua mae'a togafitiga i le fusi Ag oxysols e 2.35 mm2 pe a fa'atusatusa i le 2.96 mm2 mo manu'a na togafitia i le vaega pulea, ae o lenei eseesega e le'i o'o atu i le taua fa'amaumauga (p = 0.488) (Ata 6I). I se fa'atusatusaga, e leai se fa'aitiitiga o le vaega o le manu'a na matauina ina ua mae'a togafitiga i le Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) po'o le Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) pe a fa'atusatusa i le vaega pulea. Na matauina le faʻateleina o le toe faʻafouina o le epithelial i le faʻaaogaina o le Ag oxysol dressing pe a faʻatusatusa i le vaega faʻatonutonu (30% vs. 22%, i le faasologa), e ui lava e leʻi oʻo atu lenei mea i se tulaga taua (p = 0.067), ae o se mea taua tele lenei ma faʻamaonia ai taunuuga muamua. O le faʻaaogaina o oxysols e faʻaleleia ai le toe faʻaleleia o le epithelialization. -Epithelization o manuʻa e leʻi aʻafia17. I se faʻatusatusaga, o togafitiga i le Ag1+ poʻo le Ag1+ + EDTA/BC dressings e leai se aafiaga pe faʻaalia ai le faʻaitiitia o le toe faʻaleleia o le epithelialization pe a faʻatusatusa i le vaega faʻatonutonu.
A'afiaga o le fusi siliva i manu'a i le fa'amalologa o manu'a i isumu e le'i a'afia i le tipiina atoa. (AD) Ata fa'atusa o manu'a pe a uma aso e tolu o togafitiga i se fusi e le fa'aaogaina ai vaila'au fa'ama'i ma se fusi siliva. (EH) Vaega fa'atusa o manu'a ua valiina i le hematoxylin ma le eosin. O le fa'atatauina o le vaega o le manu'a (I) ma le pasene o le toe fa'afouina o le epithelialization (J) na fuafuaina mai vaega histological i le ogatotonu o le manu'a e fa'aaoga ai le polokalama fa'ata'ita'i ata (n = 11–12 i le vaega togafitiga). O kalafi e fa'aalia ai le averesi +/- fa'aletonu masani. * o lona uiga p = <0.05.
O le siliva ua leva ona faʻaaogaina o se togafitiga faʻamaʻi i manuʻa, ae o le tele o faʻatulagaga eseese ma auala e tuʻuina atu ai e ono iʻu ai i eseesega i le aoga o le faʻamaʻi 18. E le gata i lea, o meatotino faʻamaʻi i siama o faiga faʻapitoa e tuʻuina atu ai siliva e le o malamalama atoatoa i ai. E ui o le tali atu o le puipuiga o le tino e aoga tele e faasaga i siama planktonic, ae e masani lava e le aoga tele e faasaga i biofilms19. O siama planktonic e faigofie ona faʻaleagaina e macrophages, ae i totonu o biofilms, o sela faʻaputu e mafua ai ni faʻafitauli faaopoopo e ala i le faʻatapulaʻaina o le tali atu o le tino i le tulaga e mafai ai e sela puipuiga ona faia le apoptosis ma faʻasaʻoloto mea e mafua ai le mumū e faʻaleleia atili ai le tali atu o le puipuiga20. Ua matauina o nisi leukocytes e mafai ona ulufale i totonu o biofilms21 ae le mafai ona faʻaleagaina siama pe a faʻaleagaina lenei puipuiga22. E tatau ona faʻaaogaina se auala atoatoa e lagolago ai le tali atu o le puipuiga o le tino e faasaga i le faʻamaʻi o le biofilm i manuʻa. O le faʻamamaina o manuʻa e mafai ona faʻalavelaveina faaletino le biofilm ma aveese le tele o le bioburden, ae o le tali atu o le puipuiga o le tino e ono le aoga e faasaga i le biofilm o totoe, aemaise lava pe a faʻaleagaina le tali atu o le puipuiga o le tino. O le mea lea, o togafitiga fa'ama'i e pei o fusi siliva e mafai ona lagolagoina le tali atu o le puipuiga o le tino ma fa'aumatia ai fa'ama'i pipisi o le biofilm. O le tuufaatasiga, le fa'aputuga, le solubility, ma le substrate e tu'uina atu e mafai ona a'afia ai le aoga fa'ama'i o le siliva. I tausaga talu ai nei, o le alualu i luma i tekinolosi o le fa'agasologa o le siliva ua sili atu ona aoga ai nei fusi9,23. A'o fa'agasolo le alualu i luma o le tekinolosi o le fusi siliva, e taua le malamalama i le aoga o nei fusi i le puleaina o fa'ama'i pipisi o manu'a ma, sili atu ona taua, o le a'afiaga o nei ituaiga malolosi o le siliva i le siosiomaga o manu'a ma le fa'amalologa.
I lenei suʻesuʻega, na matou faʻatusatusaina ai le aoga o ni faʻaofuofu siliva faʻapitoa se lua ma ni faʻaofuofu siliva masani e gaosia ai ni ion Ag1+ e faʻasaga i biofilms e faʻaaogaina ai faʻataʻitaʻiga eseese i totonu o le vitro ma totonu o le vivo. Na matou iloiloina foʻi le aʻafiaga o nei faʻaofuofu i le siosiomaga o manuʻa ma le faʻamalologa e tutoʻatasi mai faʻamaʻi. Ina ia faʻaitiitia le aʻafiaga o le matrix tuʻuina atu, o faʻaofuofu siliva uma na faʻataʻitaʻiina na faia i le carboxymethylcellulose.
O la matou iloiloga muamua o nei fusi siliva e faasaga i biofilms colonial o Pseudomonas aeruginosa ma Staphylococcus aureus e faaalia ai, e le pei o fusi Ag1+ masani, e lua fusi siliva fa'aonaponei, Ag1+ + EDTA/BC ma oxygenated Ag salts, e aoga i le 5. Fasiotiga lelei siama biofilm i totonu o ni nai aso. E le gata i lea, o nei fusi e taofia ai le toe fausiaina o le biofilm pe a fa'aalia soo i siama planktonic. O le fusi Ag1+ sa i ai le silver chloride, o le siliva tutusa ma le base matrix e pei o le Ag1+ + EDTA/BC, ma e iai sona aafiaga fa'atapula'a i le ola o siama i totonu o le biofilm i le vaitaimi lava e tasi. O le matauina o se Ag1+ + EDTA/BC fusi e sili atu le aoga e faasaga i le biofilm nai lo se Ag1+ fusi e aofia ai le matrix tutusa ma se siliva fa'aputu e lagolagoina ai le manatu e mana'omia ni mea fa'aopoopo e fa'ateleina ai le aoga o le silver chloride e faasaga i le biofilm, e pei ona lipotia mai i isi mea15. O nei taunuuga e lagolagoina ai le manatu o le BC ma le EDTA e iai se isi matafaioi e fesoasoani i le aoga lautele o le fa'aofuofu ma o le leai o lenei vaega i le Ag1+ dressings atonu na fesoasoani i le le mafai ona fa'aalia le aoga in vitro. Na matou iloa ai o le oxygenated Ag masm dressings e gaosia ai Ag2+ ma Ag3+ ions na fa'aalia ai le malosi tele o le antibacterial effect nai lo le Ag1+ ma i tulaga e tutusa ma le Ag1+ + EDTA/BC. Peita'i, ona o le maualuga o le redox potential, e le o manino pe o le a le umi e tumau ai le malosi ma le aoga o Ag3+ ions e fa'asaga i biofilms manu'a ma o lea e tatau ai ona faia nisi su'esu'ega. E le gata i lea, e tele ituaiga eseese o fa'aofuofu e gaosia ai Ag1+ ions e le'i fa'ata'ita'iina i lenei su'esu'ega. O nei fa'aofuofu e aofia ai ni siliva eseese, concentrations, ma base matrices, lea e ono a'afia ai le tu'uina atu o Ag1+ ions ma lo latou aoga e fa'asaga i biofilms. E taua fo'i le maitauina o lo'o iai le tele o fa'ata'ita'iga eseese in vitro ma in vivo e fa'aaogaina e iloilo ai le aoga o fa'aofuofu manu'a e fa'asaga i biofilms. O le ituaiga o fa'ata'ita'iga e fa'aaogaina, fa'apea fo'i ma le masima ma le porotini o le media e fa'aaogaina i nei fa'ata'ita'iga, o le a a'afia ai le aoga o le fa'aofuofu. I la matou faʻataʻitaʻiga in vivo, na matou faʻatagaina le biofilm e matua i totonu o le vitro ona faʻaliliuina lea i luga o le paʻu o le manuʻa. O le tali atu o le puipuiga o isumu e aoga tele e faasaga i siama planktonic e faʻaaogaina i le manuʻa, ma fausia ai se biofilm aʻo faʻamalolo le manuʻa. O le faʻaopoopoina o le biofilm matua i se manuʻa e faʻatapulaʻaina ai le aoga o le tali atu o le puipuiga o le tagata i le fausiaina o le biofilm e ala i le faʻatagaina o le biofilm matua e faʻatuina i totonu o le manuʻa aʻo leʻi amata ona faʻamalolo. O lea la, o la matou faʻataʻitaʻiga e mafai ai ona matou iloiloina le aoga o fusi faʻamaʻi i luga o biofilm matua aʻo leʻi amata ona faʻamalolo manuʻa.
Na matou iloa foʻi o le fetaui lelei o le fusi na aʻafia ai le aoga o fusi siliva i luga o biofilms na totoina i totonu o le vitro ma le paʻu puaʻa. O le fesootaʻi vavalalata ma le manuʻa e taua tele mo le aoga o le fusi e teteʻe ai siama24,25. O fusi o loʻo i ai le oxygenated Ag sa fesootaʻi vavalalata ma biofilms ua matutua, ma iʻu ai i le faʻaitiitia tele o le aofaʻi o siama ola i totonu o le biofilm pe a uma le 24 itula. I se faʻatusatusaga, pe a togafitia i Ag1+ ma Ag1+ + EDTA/BC fusi, na totoe ai le tele o siama ola. O nei fusi o loʻo i ai ni sutures i le umi atoa o le fusi, lea e fausia ai avanoa mate e taofia ai le fesootaʻi vavalalata ma le biofilm. I a matou suʻesuʻega i totonu o le vitro, o nei vaega e le fesootaʻi na taofia ai le fasiotia o siama ola i totonu o le biofilm. Na matou iloiloina le ola o siama pe a uma le 24 itula o togafitiga; I le aluga o taimi, a o faʻasusu atili le fusi, atonu e itiiti le avanoa mate, ma faʻaitiitia ai le nofoaga mo nei siama ola. Peitaʻi, o lenei mea e faʻamamafaina ai le taua o le tuʻufaʻatasiga o le fusi, ae le naʻo le ituaiga siliva i totonu o le fusi.
E ui o suʻesuʻega in vitro e aoga mo le faʻatusatusaina o le aoga o tekinolosi siliva eseese, ae e taua foʻi le malamalama i aafiaga o nei fusi i biofilms i vivo, lea e fesoasoani ai le aano o le tagata ma tali atu o le puipuiga i le aoga o fusi e faʻasaga i biofilms. O le aafiaga o nei fusi i biofilms o manuʻa na matauina e faʻaaoga ai le scanning electron microscopy ma le valiina o le EPS o le biofilm e faʻaaoga ai vali DNA i totonu ma fafo. Na matou iloa ina ua mavae aso e 3 o togafitiga, o fusi uma sa aoga i le faʻaitiitia o le DNA e leai ni sela i manuʻa ua aʻafia i le biofilm, ae o le fusi Ag1+ sa le aoga tele i manuʻa ua aʻafia i le Staphylococcus aureus. O le scanning electron microscopy na faʻaalia ai foʻi e itiiti lava siama na i ai i manuʻa na togafitia i fusi siliva, e ui lava ina sili atu ona iloga lenei mea i le fusi masima Ag oxygenated ma le fusi Ag1+ + EDTA/BC pe a faʻatusatusa i le fusi Ag1+. O nei faʻamaumauga e faʻaalia ai o fusi siliva na faʻataʻitaʻiina e eseese tikeri o le aʻafiaga i le fausaga o biofilm, ae leai se tasi o fusi siliva na mafai ona faʻaumatia le biofilm, e lagolagoina ai le manaʻomia o se auala atoatoa i le togafitia o faʻamaʻi pipisi biofilm o manuʻa; faʻaaogaina o fusi lima siliva. E muamua ona faia le togafitiga i le aveeseina o le tele o vaega o le tino (biofilm).
O manu'a tumau e masani ona i ai i se tulaga o le mumū tele, faatasi ai ma le tele o sela mumū e tumau i totonu o le aano o le manu'a mo se taimi umi, e mafua ai ona faaleagaina aano ma fa'aitiitia ai le okesene e mana'omia mo le metabolism lelei o sela ma le galuega i totonu o le manu'a26. O biofilms e fa'ateteleina ai lenei siosiomaga leaga o le manu'a e ala i le a'afia leaga o le fa'amalologa i le tele o auala, e aofia ai le taofia o le fa'ateleina o sela ma le femalaga'i ma le fa'agaoioia o cytokines proinflammatory27. A'o fa'ateleina le aoga o fusi siliva, e taua le malamalama i le a'afiaga o latou i le siosiomaga o le manu'a ma le fa'amalologa.
O le mea e malie ai, e ui o fusi siliva uma na aʻafia ai le tuufaatasiga o le biofilm, ae na o fusi masima siliva ua faʻaʻokeseneina na faʻateleina ai le toe faʻafouina o nei manuʻa ua aʻafia. O nei faʻamaumauga e lagolagoina ai a matou sailiga muamua17 ma i latou na maua e Kalan et al. (2017)28, lea na faʻaalia ai le saogalemu lelei ma le oona o masima siliva ua faʻaʻokeseneina, aua o le maualalo o le siliva e aoga e faʻasaga i biofilms.
O la matou suʻesuʻega o loʻo iai nei o loʻo faʻamamafaina ai eseesega i le tekonolosi siliva i le va o fusi siliva e teteʻe i siama ma le aʻafiaga o lenei tekinolosi i le siosiomaga o manuʻa ma le faʻamalologa e le faʻamaʻi. Peitaʻi, o nei taunuuga e ese mai suʻesuʻega na muamua atu o loʻo faʻaalia ai o le fusi Ag1+ + EDTA/BC na faʻaleleia atili ai tulaga faʻamalolo o taliga lapiti ua manuʻa i totonu o le tino ola. Peitaʻi, atonu e mafua mai i eseesega i faʻataʻitaʻiga o manu, taimi fuaina, ma auala faʻaoga siama29. I lenei tulaga, na faia fua o manuʻa i le 12 aso talu ona manuʻa ina ia mafai ai e mea aoga o le fusi ona galue i luga o le biofilm i se taimi umi. O loʻo lagolagoina lenei mea e se suʻesuʻega na faʻaalia ai o maʻi vae ua aʻafia i togafitiga faafomaʻi na togafitia i le Ag1+ + EDTA/BC na muamua faʻateleina le tele pe a uma le vaiaso e tasi o togafitiga, ona sosoo ai lea ma le isi 3 vaiaso o togafitiga i le Ag1+ + EDTA/BC ma i totonu o le 4 vaiaso o le faʻaaogaina o vailaʻau e le o ni vailaʻau teteʻe i siama. fusi CMC e faʻaitiitia ai le tele o maʻi30.
O nisi o ituaiga ma le tele o le siliva ua faʻaalia muamua e afaina ai sela i totonu o le vitro 11, ae o nei taunuuga i totonu o le vitro e le o taimi uma e faʻaliliuina ai i ni aafiaga leaga i totonu o le tino ola. E le gata i lea, o le alualu i luma i tekinolosi siliva ma le malamalama atili i mea faʻapipiʻi siliva ma le tele o mea i totonu o fusi ua taʻitaʻia ai le atinaʻeina o le tele o fusi siliva saogalemu ma aoga. Peitaʻi, aʻo faʻagasolo le alualu i luma o le tekinolosi o le fusi siliva, e taua le malamalama i le aʻafiaga o nei fusi i le siosiomaga o manuʻa31,32,33. Na lipotia muamua o le faʻateleina o le fua faatatau o le toe faʻaleleia o le epithelialization e tutusa ma le faʻateleina o le tele o macrophages M2 e teteʻe i le mumū pe a faʻatusatusa i le phenotype pro-inflammatory M1. Na matauina lenei mea i se faʻataʻitaʻiga muamua o isumu lea na faʻatusatusa ai fusi manuʻa hydrogel siliva ma silver sulfadiazine ma hydrogels e le o ni antimicrobial34.
E ono iai le tele o le mumū i manu'a tumau ma ua matauina o le iai o le tele o neutrophils e ono afaina ai le fa'amalologa o manu'a35. I se su'esu'ega i isumu ua leai ni neutrophil, o le iai o neutrophils na fa'atuai ai le toe fa'aleleia o le epithelialization. O le iai o le tele o neutrophils e mafua ai le maualuga o le maualuga o proteases ma reactive oxygen species, e pei o le superoxide ma le hydrogen peroxide, lea e feso'ota'i ma manu'a tumau ma le fa'amalologa lemu37,38. E fa'apena fo'i, o le fa'ateleina o le numera o macrophage, pe a le pulea, e mafai ona mafua ai le fa'atuai o le fa'amalologa o manu'a39. O lenei fa'ateleina e matua taua lava pe afai e le mafai e macrophages ona sui mai se phenotype pro-inflammatory i se phenotype pro-healing, ma mafua ai ona le mafai e manu'a ona alu ese mai le vaega o le mumū o le fa'amalologa40. Na matou matauina se fa'aitiitia o neutrophils ma macrophages i manu'a ua a'afia i le biofilm ina ua mavae aso e 3 o togafitiga i fusi siliva uma, ae o le fa'aitiitia na sili atu ona iloga i fusi masima oxygenated. O lenei fa'aitiitia atonu o se taunuuga tuusa'o o le tali atu o le puipuiga o le tino i le siliva, o se tali atu i le fa'aitiitia o le bioburden, po'o le manu'a o lo'o i ai i se tulaga mulimuli ane o le fa'amalologa ma o lea ua fa'aitiitia ai sela puipuiga o le tino i le manu'a. O le faʻaitiitia o le aofaʻi o sela mumū i le manuʻa e ono faʻatumauina ai se siosiomaga e fesoasoani i le faʻamalologa o manuʻa. E le o manino le faiga o le gaioiga o le auala e faʻalauiloa ai e le Ag oxysalts le faʻamalologa e aunoa ma se faʻamaʻi, ae o le mafai e le Ag oxysalts ona gaosia le okesene ma faʻaumatia ai tulaga leaga o le hydrogen peroxide, o se vailaʻau e mafua ai le mumū, atonu e faʻamatalaina ai lenei mea ma e manaʻomia ai nisi suʻesuʻega17.
O manu'a tumau e le fa'amaloloina ma ua a'afia i le siama e avea ma fa'afitauli mo foma'i ma gasegase. E ui o le tele o fusi e fai mai e aoga mo siama, ae e seasea ona taula'i su'esu'ega i isi mea taua e a'afia ai le siosiomaga o le manu'a. O lenei su'esu'ega e fa'aalia ai o tekinolosi siliva eseese e eseese le aoga mo siama ma, e taua tele, o a'afiaga eseese i le siosiomaga o le manu'a ma le fa'amalologa, e tuto'atasi mai le fa'ama'i. E ui o nei su'esu'ega in vitro ma in vivo e fa'aalia ai le aoga o nei fusi i le togafitia o fa'ama'i o le manu'a ma le fa'aleleia atili o le fa'amalologa, ae e mana'omia ni fa'ata'ita'iga fa'atonutonu fa'afuase'i e iloilo ai le aoga o nei fusi i le falema'i.
O faʻamaumauga na faʻaaogaina ma/pe auʻiliʻiliina i le taimi o le suʻesuʻega o loʻo iai nei o loʻo maua mai le tusitala talafeagai pe a manaʻomia.